Usaldusväärsete ja standardiseeritud meetodite väljatöötamine sääseparvede vastuvõtlikkuse testimiseks insektitsiidide suhtes on uute toimeainete või ravimvormide tõhususe mõistmiseks ülioluline. Meetodid sääseparvede vastuvõtlikkuse testimiseks kontaktinsektitsiidide või -toodete (näiteks rahvatervise programmides reklaamitavate) suhtes on hästi väljakujunenud ja standardiseeritud. Kodumajapidamistarvetes kasutatavate lenduvate või aerosoolsete insektitsiidide testimismeetodeid on aga keeruline tõhusalt rakendada. Maailma Terviseorganisatsiooni kodumajapidamises kasutatavate insektitsiidide soovituste põhjal töötasime välja standardiseeritud ja suure läbilaskevõimega meetodi aerosooltoodete testimiseks puuris sääskede abil ning tõhusa desinfitseerimismeetodi Peet-Grady katsekambris (PG katsekamber). Valideerisime selle uue meetodi tõhusust insektitsiidiresistentsete ja vastuvõtlike Aedes ja Anopheles sääskede populatsioonide abil. Selle meetodi uudne omadus on sääsepuuridele suunatud kambri lisamine, mis võimaldab sääskede tapmismäärade reaalajas kvantitatiivset hindamist pärast insektitsiidiga kokkupuudet. Tampooni desinfitseerimine eemaldab tõhusalt katsekambri pinnalt järelejäänud püretroidi sisaldava aerosoolõli, kusjuures otse kambri pinnal testitud vastuvõtlike sääskede suremus on alla 2%. PG kambris ei täheldatud puuris sääskede tapmis- ega suremusmäärade ruumilist heterogeensust. Meie kahe puuri meetod pakub kaheksa korda suuremat läbilaskevõimet kui vabalennu meetod, võimaldades erinevate sääsetüvede samaaegset testimist ja paralleelselt testitud vastuvõtlike ja resistentsete sääskede populatsioonide tõhusat eristamist.
Praeguseks on aerosool-insektitsiide kasutatud peamiselt kodudes isiklikuks kaitseks, piiratud kasutusega rahvatervise programmides. Hiljutised uuringud on aga näidanud laialdast kodumajapidamises kasutatavate insektitsiidide kasutamist piirkondades, kus vektorite kaudu levivad haigused on levinud. Olenemata sellest, kas motivatsiooniks on sääsetõrjevahend või haiguste ennetamine, on tungiv vajadus standardiseeritud ja hõlpsasti kasutatavate meetodite järele endeemiliste sääskede populatsioonide skriinimiseks kodumajapidamises kasutatavate insektitsiidide suhtes vastuvõtlikkuse suhtes. See on ülioluline insektitsiidide efektiivsuse ennustamiseks kohalike vektorite suhtes ja mõistmiseks, kuidas kodumajapidamises kasutatav insektitsiidide kasutamine mõjutab insektitsiidiresistentsuse evolutsioonilist valikut.
Lisameetod 1 annab üksikasjalikud samm-sammult juhised meie aerosoolsete insektitsiidide testimise programmi läbiviimiseks.
Kuigi WHO suunised soovitavad kasutada automaatseid nebulisaatoreid, ei anna need spetsiifilisi tehnilisi kirjeldusi. Automaatsete nebulisaatorite kasutamine on ülioluline, kuna käsitsi nebuliseerimine propüleenglükoolikambris on mitte ainult töömahukas, vaid võib põhjustada ka ruumilisi ebajärjekindlust ja nebulisatsiooni kestuse varieerumist.
Reaktsioonikamber tuleb pärast iga testi steriliseerida, kuid WHO suunistes soovitatud sisemine puhastusmeetod hõlmab vee pealekandmist voolikust. Meie igapäevatöös on see meetod bioanalüütiliste seadmete käitamise kõige töömahukam etapp, seega töötasime välja ja testisime tampoonipõhist steriliseerimisprotseduuri.
Ventilaatori eemaldatavaid osi töödeldakse nagu eespool kirjeldatud ning ventilaatori labasid ja raami puhastatakse 5% Decon 90 lahusesse kastetud käsnaga.
Pihustamise kestuse ja toote etteandekiiruse vahelise seose põhjal näitas meie aerosoolpihusti ka head täpsust aerosooli doosisuhte kontrollimisel, vähemalt testitud vahemikus 1 kuni 4 korda. Nagu on näidatud joonisel 3b, on see omadus eriti oluline uute aerosoolpreparaatide doosi-vastuse suhte iseloomustamiseks või insektitsiidiresistentsuse tuvastamiseks vajaliku identifitseerimisdoosi määramiseks.
Me demonstreerime, et meie muudetud protokoll kodumajapidamises kasutatavate aerosoolsete insektitsiidide hindamiseks, mis kasutab tampooniga desinfitseerimist, topeltpuuri, kaugjuhitavaid pihusteid ja biomeetrilist salvestamist tegevuskaameratest, on praegusele protokollile tõhusam ja teostatavam alternatiiv.WHOsoovitused. Tampooniga desinfitseerimise meetod, mis võtab aega vaid 20 minutit, säästab oluliselt aega võrreldes olemasoleva protokolliga (mis tavaliselt võtab aega ühe tunni katsekambri kohta). See vähendab ka aega, mis kulub operaatoritele täielike isikukaitsevahendite (nt hingamisteede kiivrite ja antistaatilise tööriietuse) kandmiseks. Lisaks tekitab see meetod vähem saastunud vedelikku ja riietust töötlemiseks kui katsekambri täielik puhastamine, minimeerides seeläbi katsekambrit majutava ruumi saastumise võimalust. Tampooniga desinfitseerimise meetod sobib ka poolpüsivate katseruumide desinfitseerimiseks, mis vajavadminimaalneMööbli paigutus erinevates ruumides.
Käesolevas ja teistes uuringutes on põhiküsimuseks keskkonnas kasutatavate insektitsiidide dooside standardiseerimine erinevate testimisprotokollide puhul. Nagu joonisel 2b näidatud, varieerus pihustusmaht aerosoolpurkide tüüpide lõikes vaatamata fikseeritud pihustamise kestusele, mis võib peegeldada erinevusi tootmisprotsessides (nt siserõhk, propellendi kasutamine, düüsi struktuur jne). Lisaks piirab praeguse kaubanduslikult saadaolevate kaugpihustusseadmete puudumine, millel oleks pihustamise kestuse osas vajalik paindlikkus, nende kasutamist sääsetõrje doos-vastuse seose hindamisel. Manuaalne pritsimine testluukide või juurdepääsuluukide kaudu (kui need on olemas) võib põhjustada dooside varieerumist. Tegelikult rõhutavad meie tulemused nende varieeruvuse allikate vähendamise vajadust ja olulisust. Resistentsete Aedes aegypti populatsioonide puhul täheldasime korrelatsiooni aerosooli doosi ja tundlikkuse või resistentsuse lõpliku määramise vahel (joonis 3b). Ideaalis tuleks aerosooli doosid standardiseerida aerosoolistatud aine grammides, mitte aerosoolimise kestuses, et hõlbustada erinevate uuringute võrdlemist.
RCAD pakub edasisteks uuringuteks alternatiivset lähenemisviisi, mis minimeerib protsessivariatsioonide mõju. Kuigi leidsime, et aerosoolpihustite standardiseerimine pole teostatav, näitasime, et erinevate aerosoolpurkide kaudu tarnitava aerosooli massi saab reprodutseeritavalt hinnata pihustuspikkuse kalibreerimise abil (joonis 2b, 3a). Selline aerosooli kontsentratsiooni standardiseerimine mis tahes katsekambris on tulemuste reprodutseeritavuse parandamiseks ülioluline.
Meie ja teiste uurimisrühmade kogemuste põhjal tekitavad käesolevas suunises sisalduvad soovitused aerosoolide tuvastamise meetodite kasutamise kohta vabalt lendavate sääskede testimiseks olulisi logistilisi väljakutseid laboratoorsete ja poolväliuuringute jaoks. Näiteks on vabalt lendavate sääskede tuvastamise meetoditel väga madal läbilaskevõime (sealhulgas ellujäänud vabalt lendavate sääskede töömahukas püüdmine) ja neil on mitmeid tehnilisi piiranguid, näiteks raskused tapmismäärade reaalajas määramisel.
Kuigi meie valideeritud topeltpuuri katse käsitleb voolupiirangute probleemi ja on teostatav meetod sääskede vastuvõtlikkuse skriinimiseks aerosool-insektitsiidide suhtes, tuleb märkida, et Kaimanisaarte sääskede suremus oli puurikatses oluliselt madalam kui vabalennu katses (joonis 5c, tabel 1). See erinevus võib peegeldada insektitsiidi annuse vähenemist puuris, kuna läbi võrgu tungib ja puuri siseneb vähem aerosoolitilku. Edasised uuringud võiksid kasutada suurema võrgusilmaga kangaid ja puuri konstruktsioone, millel on suurem ventilaatori õhuvoolu kiirus (nt silindrilised konstruktsioonid), et veelgi valideerida erinevate katsemeetoditega saadud tulemusi.
Postituse aeg: 02.02.2026