Vistseraalne leishmaniaas (VL), mida India subkontinendil tuntakse kala-azarina, on lipuliste algloomade Leishmania põhjustatud parasiithaigus, mis võib viivitamatu ravi puudumisel lõppeda surmaga. Liivakärbes Phlebotomus argentipes on ainus kinnitatud VL-i vektor Kagu-Aasias, kus seda kontrollib sünteetiline insektitsiid siseruumides pihustamine (IRS). DDT kasutamine VL tõrjeprogrammides on toonud kaasa resistentsuse kujunemise liivakärbestel, mistõttu on DDT asendatud putukamürgi alfa-tsüpermetriiniga. Kuid alfa-tsüpermetriin toimib sarnaselt DDT-ga, seega suureneb liivakärbeste resistentsuse risk stressi korral, mis on põhjustatud korduvast kokkupuutest selle insektitsiidiga. Selles uuringus hindasime metsikute sääskede ja nende F1 järglaste tundlikkust CDC pudeli biotesti abil.
Kogusime sääski 10 külast Biharis, Indias Muzaffarpuris. Kaheksa küla jätkas suure võimsusega kasutamisttsüpermetriinsisepihustamiseks lõpetas üks küla tugevatoimelise tsüpermetriini kasutamise siseruumides pritsimiseks ja ühes külas ei kasutatud kunagi tugevatoimelist tsüpermetriini siseruumides pritsimiseks. Kogutud sääsed eksponeeriti kindlaksmääratud aja jooksul eelnevalt kindlaksmääratud diagnostilise annusega (3 μg / ml 40 minuti jooksul) ning 24 tundi pärast kokkupuudet registreeriti mahalangemise määr ja suremus.
Metsikute sääskede hukkumise määr oli vahemikus 91,19% kuni 99,47% ja nende F1 põlvkondade omad vahemikus 91,70% kuni 98,89%. 24 tundi pärast kokkupuudet oli metsikute sääskede suremus 89,34–98,93% ja nende F1 põlvkonna suremus 90,16–98,33%.
Selle uuringu tulemused näitavad, et P. argentipes võib tekkida resistentsus, mis viitab vajadusele jätkuva seire ja valvsuse järele, et säilitada kontroll pärast likvideerimise saavutamist.
Vistseraalne leishmaniaas (VL), mida India subkontinendil tuntakse kala-azarina, on parasiithaigus, mille põhjustab lipuline algloom Leishmania ja mis levib nakatunud emaste liivakärbeste (Diptera: Myrmecophaga) hammustuse kaudu. Liivkärbsed on ainus kinnitatud VL-i vektor Kagu-Aasias. India on lähedal VL-i kaotamise eesmärgi saavutamisele. Siiski on pärast likvideerimist madala esinemissageduse säilitamiseks kriitilise tähtsusega vektorite populatsiooni vähendamine, et vältida võimalikku levikut.
Sääskede tõrje Kagu-Aasias saavutatakse siseruumides pihustamise (IRS) abil, kasutades sünteetilisi insektitsiide. Hõbejalgade salajane puhkekäitumine muudab need sobivaks sihtmärgiks putukamürkide tõrjeks siseruumides jääkpritsimise teel [1]. India riikliku malaariatõrjeprogrammi raames diklorodifenüültrikloroetaani (DDT) siseruumides pihustamine on avaldanud märkimisväärset ülekanduvat mõju sääskede populatsiooni tõrjele ja VL-i juhtude märkimisväärsele vähendamisele [2]. See VL-i planeerimata tõrje ajendas India VL-i likvideerimisprogrammi võtma siseruumides jääkpritsimise kasutusele peamise hõbejalgade tõrjemeetodina. 2005. aastal kirjutasid India, Bangladeshi ja Nepali valitsused alla vastastikuse mõistmise memorandumile eesmärgiga kaotada VL 2015. aastaks [3]. Likvideerimisega seotud jõupingutused, mis hõlmavad vektorite tõrjet ning inimjuhtude kiiret diagnoosimist ja ravi, olid suunatud konsolideerimisfaasi sisenemisele 2015. aastaks, mille eesmärk muudeti hiljem 2017. ja seejärel 2020. aastaks.[4] Uus ülemaailmne tegevuskava tähelepanuta jäetud troopiliste haiguste likvideerimiseks hõlmab VL-i kõrvaldamist 2030. aastaks.[5]
Kuna India jõuab BCVD likvideerimisjärgsesse faasi, on hädavajalik tagada, et ei tekiks olulist resistentsust beeta-tsüpermetriini suhtes. Resistentsuse põhjuseks on see, et nii DDT-l kui ka tsüpermetriinil on sama toimemehhanism, nimelt on nad suunatud VGSC valgule[21]. Seega võib liivakärbeste resistentsuse tekkimise riski suurendada stress, mis on põhjustatud korrapärasest kokkupuutest väga tugeva tsüpermetriiniga. Seetõttu on hädavajalik jälgida ja tuvastada potentsiaalseid liivakärbse populatsioone, mis on selle insektitsiidide suhtes resistentsed. Sellega seoses oli selle uuringu eesmärk jälgida looduslike liivakärbeste tundlikkust, kasutades Chaubey jt poolt määratud diagnostilisi doose ja kokkupuute kestusi. [20] uuris Indias Biharis Muzaffarpuri piirkonna erinevatest küladest pärit P. argentipes'i, kus kasutati pidevalt tsüpermetriiniga töödeldud siseruumides pihustussüsteeme (pidevad IPS-külad). CDC pudeli biotesti abil võrreldi metsikute P. argentipese tundlikkust küladest, kus tsüpermetriiniga töödeldud sisepihustussüsteemide kasutamisest loobuti (endised IPS-külad) ja nendes, kus polnud kunagi kasutatud tsüpermetriiniga töödeldud sisepritsimissüsteeme (mitte-IPS-külad).
Uuringusse valiti kümme küla (joonis 1; tabel 1), millest kaheksas oli esinenud sünteetiliste püretroidide (hüpermetriin; tähistatud pidevate hüpermetriinküladena) siseruumides pidevat pihustamist ja VL-i juhtumeid (vähemalt üks juhtum) viimase 3 aasta jooksul. Ülejäänud kahest uuringus osalenud külast valiti kontrollkülaks üks küla, mis ei rakendanud beeta-tsüpermetriini sisepihustamist (mitte siseruumides pihustav küla), ja teine küla, kus oli beeta-tsüpermetriini vahelduv siseruumides pihustamine (vahelduv sisepritsimisküla / endine sisepritsimisküla). Nende külade valik põhines kooskõlastamisel terviseosakonna ja sisepihustamismeeskonnaga ning siseruumide pihustamise mikrotegevuskava kinnitamisel Muzaffarpuri rajoonis.
Muzaffarpuri linnaosa geograafiline kaart, mis näitab uuringusse kaasatud külade asukohti (1–10). Õppetöö asukohad: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Kaart koostati QGIS tarkvara (versioon 3.30.3) ja Open Assessment Shapefile abil.
Ekspositsioonikatsete pudelid valmistati Chaubey et al. [20] ja Denlinger et al. [22]. Lühidalt, 500 ml klaaspudelid valmistati üks päev enne katset ja pudelite sisesein kaeti näidatud insektitsiidiga (α-tsüpermetriini diagnostiline annus oli 3 μg / ml), kandes pudelite põhjale, seintele ja korgile putukamürgi atsetoonilahust (2, 0 ml). Seejärel kuivatati iga pudelit mehaanilisel rullikul 30 minutit. Selle aja jooksul keerake kork aeglaselt lahti, et atsetoon aurustuks. Pärast 30-minutilist kuivatamist eemaldage kork ja pöörake pudelit, kuni kogu atsetoon on aurustunud. Seejärel jäeti pudelid üleöö kuivama. Iga korduskatse jaoks kaeti üks pudel, mida kasutati kontrollina, 2,0 ml atsetooniga. Kõiki pudeleid kasutati katsete ajal uuesti pärast asjakohast puhastamist vastavalt Denlingeri et al. kirjeldatud protseduurile. ja Maailma Terviseorganisatsioon [22, 23].
Päev pärast insektitsiidide valmistamist eemaldati puuridest viaalides 30–40 loodusest püütud sääske (nälginud emasloomi) ja puhuti õrnalt igasse viaali. Iga insektitsiidiga kaetud pudeli, sealhulgas kontrollpudeli jaoks kasutati ligikaudu sama arvu kärbseid. Korrake seda igas külas vähemalt viis kuni kuus korda. Pärast 40-minutilist kokkupuudet insektitsiidiga registreeriti mahalöödud kärbeste arv. Kõik kärbsed püüti kinni mehaanilise aspiraatoriga, asetati peene võrguga kaetud pintpapp-anumatesse ja paigutati eraldi inkubaatorisse samade niiskuse ja temperatuuri tingimustes sama toiduallikaga (30% suhkrulahuses leotatud vatipallid) kui töötlemata kolooniad. Suremus registreeriti 24 tundi pärast kokkupuudet insektitsiidiga. Kõik sääsed lõigati lahti ja uuriti liigiidentiteedi kinnitamiseks. Sama protseduur tehti ka F1 järglaste kärbestega. Katkestus- ja suremusnäitajad registreeriti 24 tundi pärast kokkupuudet. Kui suremus kontrollpudelites oli < 5%, ei tehtud korduste suremuse korrigeerimist. Kui suremus kontrollpudelis oli ≥ 5% ja ≤ 20%, korrigeeriti suremust selle korduse katsepudelites Abbotti valemiga. Kui kontrollrühma suremus ületas 20%, jäeti kogu katserühm kõrvale [24, 25, 26].
Loodusest püütud P. argentipes sääskede keskmine suremus. Vearibad tähistavad keskmise standardvigu. Kahe punase horisontaalse joone ristumiskoht graafikuga (vastavalt 90% ja 98% suremus) näitab suremuse akent, milles võib tekkida resistentsus.[25]
Looduslikult püütud P. argentipes'i F1 järglaste keskmine suremus. Vearibad tähistavad keskmise standardvigu. Kahe punase horisontaalse joonega ristuvad kõverad (vastavalt 90% ja 98% suremus) näitavad suremuse vahemikku, mille üle võib resistentsus areneda[25].
Leiti, et kontroll-/mitte-IRS-küla (Manifulkaha) sääsed on insektitsiidide suhtes väga tundlikud. Metsikult püütud sääskede keskmine suremus (± SE) 24 tundi pärast löömist ja kokkupuudet oli vastavalt 99,47 ± 0,52% ja 98,93 ± 0,65% ning F1 järglaste keskmine suremus oli vastavalt 98,89 ± 1,11% ja 98,8,3,1% ± 2,3 s.
Selle uuringu tulemused näitavad, et hõbejalgadega liivakärbsed võivad tekitada resistentsust sünteetilise püretroidi (SP) α-tsüpermetriini suhtes külades, kus püretroidi (SP) α-tsüpermetriini rutiinselt kasutati. Seevastu IRS-i/kontrolliprogrammiga hõlmamata küladest kogutud hõbejalgsed liivakärbsed olid väga vastuvõtlikud. Metsikute liivakärbeste populatsioonide tundlikkuse jälgimine on oluline kasutatavate insektitsiidide tõhususe jälgimiseks, kuna see teave võib aidata hallata insektitsiidide resistentsust. Seda putukamürki kasutava IRS-i ajaloolise valikusurve tõttu on regulaarselt teatatud kõrgest DDT-resistentsuse tasemest Bihari endeemiliste piirkondade liivakärbestel [1].
Leidsime, et P. argentipes on püretroidide suhtes väga tundlik ning välikatsed Indias, Bangladeshis ja Nepalis näitasid, et IRS-il oli kõrge entomoloogiline efektiivsus, kui seda kasutati koos tsüpermetriini või deltametriiniga [19, 26, 27, 28, 29]. Hiljuti Roy et al. [18] teatas, et P. argentipes oli Nepaalis välja arendanud resistentsuse püretroidide suhtes. Meie väliuuring näitas, et hõbejalgsed liivakärbsed, mis koguti küladest, kus ei olnud IRS-iga kokku puutunud, olid väga vastuvõtlikud, kuid vahelduvatest/endistest IRS-i ja pidevatest IRS-küladest kogutud kärbsed (suremus oli vahemikus 90% kuni 97%, välja arvatud Anandpur-Haruni liivakärbsed, mille tõenäoline suremus oli 89,34% surmajärgsest kokkupuutest). [25]. Selle resistentsuse väljakujunemise üheks võimalikuks põhjuseks on surve siseruumides rutiinse pihustamise (IRS) ja juhtumipõhiste kohalike pihustusprogrammide poolt, mis on standardsed protseduurid kala-asari puhangute ohjamiseks endeemilistes piirkondades/plokkides/külades (puhangute uurimise ja ohjamise standardne tööprotseduur [30]). Selle piirkonna tundlikkuse andmed, mis on saadud CDC pudeli biotesti abil, ei ole võrdluseks kättesaadavad. Kõik varasemad uuringud on jälginud P. argentipes'i tundlikkust WHO insektitsiididega immutatud paberiga. liivakärbsed on ebaselge, sest liivakärbsed lendavad harvemini kui sääsed ja veedavad biotestis substraadiga kokkupuutes rohkem aega [23].
Sünteetilisi püretroide on Nepali VL-i endeemilistes piirkondades kasutatud alates 1992. aastast, vaheldumisi SP-de alfa-tsüpermetriini ja lambda-tsühalotriiniga liivakärbse tõrjeks [31] ning deltametriini on alates 2012. aastast kasutatud ka Bangladeshis [32]. Fenotüübiline resistentsus on avastatud hõbejalgsete liivakärbeste metsikutes populatsioonides piirkondades, kus sünteetilisi püretroide on pikka aega kasutatud [18, 33, 34]. India liivakärbse metsikutes populatsioonides on tuvastatud mittesünonüümne mutatsioon (L1014F), mida on seostatud resistentsusega DDT suhtes, mis viitab sellele, et püretroidiresistentsus tekib molekulaarsel tasemel, kuna nii DDT kui ka püretroid (alfa-tsüpermetriin) on suunatud putuka närvisüsteemis samale geenile 3 [17]. Seetõttu on likvideerimis- ja likvideerimisjärgsel perioodil hädavajalik tsüpermetriini tundlikkuse süstemaatiline hindamine ja sääseresistentsuse jälgimine.
Selle uuringu potentsiaalne piirang on see, et tundlikkuse mõõtmiseks kasutasime CDC viaali biotesti, kuid kõik võrdlused kasutasid varasemate uuringute tulemusi, kasutades WHO biotesti komplekti. Kahe biotesti tulemused ei pruugi olla otseselt võrreldavad, kuna CDC viaali biotestis mõõdetakse diagnoosiperioodi lõpus kukkumist, samas kui WHO komplekti biotestis mõõdetakse suremust 24 või 72 tundi pärast kokkupuudet (viimane aeglase toimega ühendite puhul) [35]. Teine potentsiaalne piirang on selles uuringus IRS-i külade arv võrreldes ühe IRS-i mittekuuluva külaga ja ühe IRS-i mittekuuluva / endise IRS-i külaga. Me ei saa eeldada, et ühe piirkonna üksikutes külades täheldatud sääsevektori vastuvõtlikkuse tase esindab teiste Bihari külade ja piirkondade vastuvõtlikkuse taset. Kuna India jõuab leukeemiaviiruse eliminatsioonijärgsesse faasi, on hädavajalik vältida resistentsuse märkimisväärset arengut. Vaja on kiiret resistentsuse monitooringut erinevatest piirkondadest, kvartalitest ja geograafilistest piirkondadest pärit liivakärbse populatsioonides. Selles uuringus esitatud andmed on esialgsed ja neid tuleks kontrollida Maailma Terviseorganisatsiooni [35] avaldatud identifitseerimiskontsentratsioonidega, et saada täpsem ettekujutus P. argentipes'i vastuvõtlikkusest nendes piirkondades enne vektorite tõrjeprogrammide muutmist, et säilitada madal liivakärbse populatsioon ja toetada leukeemiaviiruse eliminatsiooni.
Leukoosiviiruse vektor sääsk P. argentipes võib hakata näitama varakult resistentsuse märke ülitõhusa tsüpermetriini suhtes. Insektitsiidide resistentsuse regulaarne jälgimine P. argentipes'i looduslikes populatsioonides on vajalik vektorite tõrje sekkumiste epidemioloogilise mõju säilitamiseks. Erineva toimeviisiga insektitsiidide vaheldumine ja/või uute insektitsiidide hindamine ja registreerimine on vajalik ja soovitatav, et hallata insektitsiidresistentsust ja toetada leukoosiviiruse eliminatsiooni Indias.
Postitusaeg: 17. veebruar 2025