Vistseraalne leišmaniaas (VL), India subkontinendil tuntud kui kala-azar, on parasiithaigus, mille põhjustab viburloom Leishmania ja mis võib viivitamatu ravi puudumisel lõppeda surmaga. Liivkärbes Phlebotomus argentipes on Kagu-Aasias ainus kinnitatud VL-i vektor, kus seda tõrjeks kasutatakse sünteetilist insektitsiidi siseruumides jääkide pritsimisega (IRS). DDT kasutamine VL-i tõrjeprogrammides on põhjustanud liivkärbestel resistentsuse teket, mistõttu on DDT asendatud insektitsiidiga alfa-tsüpermetriin. Alfa-tsüpermetriin toimib aga sarnaselt DDT-le, seega suureneb liivkärbeste resistentsuse risk stressi korral, mis on põhjustatud korduvast kokkupuutest selle insektitsiidiga. Selles uuringus hindasime metsikute sääskede ja nende F1 järglaste vastuvõtlikkust CDC pudelibiotesti abil.
Kogusime sääski kümnest külast Bihari osariigis Muzaffarpuri ringkonnas Indias. Kaheksas külas jätkati kõrge potentsiaaliga preparaatide kasutamist.tsüpermetriinSiseruumides pritsimise osas lõpetas üks küla kõrge tugevusega tsüpermetriini kasutamise ja üks küla ei kasutanud kunagi kõrge tugevusega tsüpermetriini siseruumides pritsimiseks. Kogutud sääski töödeldi eelnevalt kindlaksmääratud diagnostilise annusega kindlaksmääratud aja jooksul (3 μg/ml 40 minuti jooksul) ning 24 tundi pärast kokkupuudet registreeriti surma määr ja suremus.
Metsikute sääskede surmamismäär oli vahemikus 91,19% kuni 99,47% ja nende F1-põlvkondade oma vahemikus 91,70% kuni 98,89%. 24 tundi pärast kokkupuudet oli metsikute sääskede suremus vahemikus 89,34% kuni 98,93% ja nende F1-põlvkonna oma vahemikus 90,16% kuni 98,33%.
Selle uuringu tulemused näitavad, et P. argentipes'il võib tekkida resistentsus, mis viitab vajadusele jätkuva jälgimise ja valvsuse järele, et säilitada kontroll pärast haiguse likvideerimist.
Vistseraalne leišmaniaas (VL), India subkontinendil tuntud kui kala-azar, on parasiithaigus, mille põhjustab flagellaalne algloom Leishmania ja mis levib nakatunud emaste mosaiiklaste (Diptera: Myrmecophaga) hammustuse kaudu. Mosaiiklased on Kagu-Aasias ainus kinnitatud VL-i vektor. India on VL-i likvideerimise eesmärgi saavutamisele lähedal. Madala esinemissageduse säilitamiseks pärast likvideerimist on aga kriitilise tähtsusega vähendada vektorite populatsiooni, et vältida võimalikku edasikandumist.
Kagu-Aasias toimub sääsetõrje sünteetiliste putukamürkide abil siseruumides pritsimise teel. Hõbejalgade salajane puhkekäitumine muudab nad sobivaks sihtmärgiks siseruumides pritsimisele [1]. India riikliku malaaria tõrje programmi raames diklorodifenüültrikloroetaani (DDT) siseruumides pritsimine on avaldanud märkimisväärset kõrvalmõju sääskede populatsioonide kontrollimisel ja viirusnakkuse juhtude olulisel vähendamisel [2]. See planeerimata viirusnakkuse tõrje ajendas India viirusnakkuse likvideerimise programmi võtma siseruumides pritsimise kasutusele kui hõbejalgade tõrje peamise meetodi. 2005. aastal allkirjastasid India, Bangladeshi ja Nepali valitsused vastastikuse mõistmise memorandumi eesmärgiga viirusnakkus 2015. aastaks likvideerida [3]. Likvideerimispüüdlused, mis hõlmavad nii vektorite tõrjet kui ka inimeste juhtumite kiiret diagnoosimist ja ravi, olid suunatud konsolideerumisfaasi sisenemisele 2015. aastaks, eesmärki muudeti hiljem 2017. ja seejärel 2020. aastaks.[4] Uus ülemaailmne tegevuskava tähelepanuta jäetud troopiliste haiguste likvideerimiseks hõlmab viirusnakkuse likvideerimist 2030. aastaks.[5]
Kuna India siseneb BCVD posteradicatsioonifaasi, on hädavajalik tagada, et beeta-tsüpermetriini suhtes ei tekiks olulist resistentsust. Resistentsuse põhjus on see, et nii DDT-l kui ka tsüpermetriinil on sama toimemehhanism, nimelt on need suunatud VGSC valgu vastu [21]. Seega võib resistentsuse tekke riski liivakärbestel suurendada stress, mis on põhjustatud regulaarsest kokkupuutest väga tugevatoimelise tsüpermetriiniga. Seetõttu on hädavajalik jälgida ja tuvastada potentsiaalseid liivakärbeste populatsioone, mis on sellele insektitsiidile resistentsed. Selles kontekstis oli selle uuringu eesmärk jälgida looduslike liivakärbeste vastuvõtlikkust, kasutades Chaubey jt [20] poolt määratud diagnostilisi annuseid ja kokkupuute kestust. uurisid P. argentipes'i India Bihari osariigi Muzaffarpuri ringkonna erinevates külades, kus pidevalt kasutati tsüpermetriiniga töödeldud siseruumides kasutatavaid pihustamissüsteeme (pidevad IPS-külad). CDC pudelibioanalüüsi abil võrreldi metsikute P. argentipes'i tundlikkuse staatust külades, mis olid lõpetanud tsüpermetriiniga töödeldud siseruumides kasutatavate pihustamissüsteemide kasutamise (endised IPS-külad), ja külades, mis polnud kunagi tsüpermetriiniga töödeldud siseruumides kasutatavaid pihustamissüsteeme kasutanud (mitte-IPS-külad).
Uuringusse valiti kümme küla (joonis 1; tabel 1), millest kaheksal oli anamneesis pidev sünteetiliste püretroidide (hüpermetriin; tähistatud kui pideva hüpermetriini külad) siseruumides pihustamine ja kus oli viimase 3 aasta jooksul esinenud VL-juhtumeid (vähemalt üks juhtum). Ülejäänud kahest uuringus osalenud külast valiti kontrollkülaks üks küla, kus beeta-tsüpermetriini siseruumides pritsimist ei rakendatud (küla, kus siseruumides pritsimist ei tehtud), ja teine küla, kus beeta-tsüpermetriini siseruumides pritsiti vahelduva sagedusega (küla, kus siseruumides pritsiti vahelduva sagedusega/endine siseruumides pritsimise küla), kontrollkülaks. Nende külade valik põhines koostööl tervishoiuameti ja siseruumides pritsimise meeskonnaga ning Muzaffarpuri ringkonna siseruumides pritsimise mikro tegevuskava valideerimisel.
Muzaffarpuri piirkonna geograafiline kaart, mis näitab uuringusse kaasatud külade asukohti (1–10). Uuringu asukohad: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Kaart koostati QGIS tarkvara (versioon 3.30.3) ja Open Assessment Shapefile'i abil.
Kokkupuutekatsete pudelid valmistati ette Chaubey jt [20] ja Denlingeri jt [22] meetodite kohaselt. Lühidalt, üks päev enne katset valmistati ette 500 ml klaaspudelid ja pudelite siseseinad kaeti näidatud insektitsiidiga (α-tsüpermetriini diagnostiline annus oli 3 μg/ml), kandes insektitsiidi atsetoonilahust (2,0 ml) pudelite põhjale, seintele ja korgile. Seejärel kuivatati iga pudelit mehaanilisel rullil 30 minutit. Selle aja jooksul keerake kork aeglaselt lahti, et atsetoon aurustuks. Pärast 30-minutist kuivatamist eemaldage kork ja pöörake pudelit, kuni kogu atsetoon on aurustunud. Seejärel jäeti pudelid üleöö kuivama lahti. Iga korduskatse jaoks kaeti üks kontrollpudel 2,0 ml atsetooniga. Kõiki pudeleid kasutati katsete ajal uuesti pärast asjakohast puhastamist vastavalt Denlingeri jt ja Maailma Terviseorganisatsiooni [22, 23] kirjeldatud protseduurile.
Päev pärast insektitsiidi valmistamist eemaldati puuridest viaalides 30–40 loodusest püütud sääske (nälginud emased) ja puhuti õrnalt igasse viaali. Iga insektitsiidiga kaetud pudeli kohta kasutati ligikaudu sama palju kärbseid, sealhulgas kontrollpudelit. Korrake seda igas külas vähemalt viis kuni kuus korda. Pärast 40-minutilist kokkupuudet insektitsiidiga registreeriti maha löödud kärbeste arv. Kõik kärbsed püüti kinni mehaanilise aspiraatoriga, paigutati peene võrguga kaetud pinti suurustesse pappkonteineritesse ja paigutati eraldi inkubaatorisse samades niiskuse- ja temperatuuritingimustes koos sama toiduallikaga (30% suhkrulahuses leotatud vatipallid) kui töötlemata kolooniates. Suremus registreeriti 24 tundi pärast insektitsiidiga kokkupuudet. Kõik sääsed dissekteeriti ja uuriti liigiidentiteedi kinnitamiseks. Sama protseduur viidi läbi F1 järglaste kärbestega. Maha löömise ja suremuse määr registreeriti 24 tundi pärast kokkupuudet. Kui suremus kontrollpudelites oli < 5%, siis kordustes suremuse korrektsiooni ei tehtud. Kui suremus kontrollpudelis oli ≥ 5% ja ≤ 20%, korrigeeriti selle replikaadi testpudelite suremust Abbotti valemi abil. Kui suremus kontrollrühmas ületas 20%, jäeti kogu testrühm kõrvale [24, 25, 26].
Loodusest püütud P. argentipes sääskede keskmine suremus. Vearibad tähistavad keskmise standardvigu. Kahe punase horisontaaljoone ja graafiku ristumiskoht (vastavalt 90% ja 98% suremus) näitab suremuse akent, mille jooksul võib tekkida resistentsus.[25]
Loodusest püütud P. argentipes'i F1 järglaste keskmine suremus. Vearibad tähistavad keskmise standardvigu. Kahe punase horisontaaljoonega ristuvad kõverad (vastavalt 90% ja 98% suremus) tähistavad suremuse vahemikku, mille ulatuses resistentsus võib välja areneda [25].
Kontroll-/mitte-IRS-küla (Manifulkaha) sääsed leiti olevat insektitsiidide suhtes väga tundlikud. Loodusest püütud sääskede keskmine suremus (±SE) 24 tundi pärast putukate mahasurumist ja kokkupuudet oli vastavalt 99,47 ± 0,52% ja 98,93 ± 0,65% ning F1 järglaste keskmine suremus oli vastavalt 98,89 ± 1,11% ja 98,33 ± 1,11% (tabel 2, 3).
Selle uuringu tulemused näitavad, et hõbejalg-liivakärbsed võivad külades, kus püretroidi (SP) α-tsüpermetriini rutiinselt kasutati, välja arendada resistentsus sünteetilise püretroidi (SP) α-tsüpermetriini suhtes. Seevastu leiti, et hõbejalg-liivakärbsed, mis on kogutud küladest, mis ei ole hõlmatud IRS/tõrjeprogrammiga, olid väga vastuvõtlikud. Metsikute liivakärbeste populatsioonide vastuvõtlikkuse jälgimine on oluline kasutatavate insektitsiidide tõhususe jälgimiseks, kuna see teave võib aidata insektitsiidiresistentsuse ohjamisel. Bihari endeemilistest piirkondadest pärit liivakärbestel on regulaarselt teatatud kõrgest DDT-resistentsuse tasemest, mis on tingitud IRS-i ajaloolisest selektsioonisurvest selle insektitsiidi kasutamisel [1].
Leidsime, et P. argentipes on püretroidide suhtes väga tundlik ning Indias, Bangladeshis ja Nepalis läbi viidud välikatsed näitasid, et IRS-il oli tsüpermetriini või deltametriiniga kombineeritult kasutamisel kõrge entomoloogiline efektiivsus [19, 26, 27, 28, 29]. Hiljuti teatasid Roy jt [18], et P. argentipes oli Nepalis püretroidide suhtes resistentsuse välja arendanud. Meie väliuuringu tundlikkuse uuring näitas, et hõbejalg-liivakärbsed, kes olid kogutud IRS-iga mitte kokkupuutunud küladest, olid väga vastuvõtlikud, kuid vahelduva/endise IRS-iga ja pideva IRS-iga küladest (suremus oli vahemikus 90% kuni 97%, välja arvatud Anandpur-Haruni liivakärbsed, kelle suremus 24 tundi pärast kokkupuudet oli 89,34%) kogutud kärbsed olid tõenäoliselt väga efektiivse tsüpermetriini suhtes resistentsed [25]. Üks võimalik põhjus selle resistentsuse tekkeks on surve, mida avaldavad siseruumides tehtav rutiinne pritsimine (IRS) ja juhtumipõhised kohalikud pritsimisprogrammid, mis on standardprotseduurid kala-asari puhangute ohjamiseks endeemilistes piirkondades/kvartalites/külades (puhangute uurimise ja ohjamise standardne töökord [30]. Selle uuringu tulemused annavad varajasi märke selektiivse surve tekkest väga efektiivse tsüpermetriini vastu. Kahjuks ei ole selle piirkonna ajaloolised tundlikkusandmed, mis on saadud CDC pudeli biotesti abil, võrdluseks saadaval; kõik varasemad uuringud on jälginud P. argentipes'i tundlikkust WHO insektitsiidiga immutatud paberi abil. WHO testribades olevad insektitsiidide diagnostilised annused on insektitsiidide soovitatavad identifitseerimiskontsentratsioonid malaaria vektorite (Anopheles gambiae) vastu kasutamiseks ning nende kontsentratsioonide operatiivne rakendatavus liivakärbeste suhtes on ebaselge, kuna liivakärbsed lendavad harvemini kui sääsed ja veedavad biotestis substraadiga rohkem aega kokkupuutes [23].
Sünteetilisi püretroide on Nepali viirusnakkuse endeemilistes piirkondades kasutatud alates 1992. aastast, vaheldumisi SP-dega alfa-tsüpermetriini ja lambda-tsühalotriiniga liivakärbeste tõrjeks [31], ning deltametriini on alates 2012. aastast kasutatud ka Bangladeshis [32]. Fenotüübilist resistentsust on tuvastatud hõbejalg-liivakärbeste metsikutes populatsioonides piirkondades, kus sünteetilisi püretroide on pikka aega kasutatud [18, 33, 34]. India liivakärbeste metsikutes populatsioonides on tuvastatud mittesünonüümne mutatsioon (L1014F), mida on seostatud DDT-resistentsusega, mis viitab sellele, et püretroidresistentsus tekib molekulaarsel tasandil, kuna nii DDT kui ka püretroid (alfa-tsüpermetriin) on suunatud putuka närvisüsteemis sama geeni vastu [17, 34]. Seetõttu on tsüpermetriini tundlikkuse süstemaatiline hindamine ja sääskede resistentsuse jälgimine hävitamise ja hävitamisjärgse perioodi jooksul hädavajalik.
Selle uuringu võimalik piirang on see, et tundlikkuse mõõtmiseks kasutasime CDC viaali biotesti, kuid kõik võrdlused kasutasid varasemate uuringute tulemusi, milles kasutati WHO biotesti komplekti. Kahe biotesti tulemused ei pruugi olla otseselt võrreldavad, kuna CDC viaali biotest mõõdab diagnostilise perioodi lõpus vaibumist, samas kui WHO komplekti biotest mõõdab suremust 24 või 72 tundi pärast kokkupuudet (viimane aeglase toimega ühendite puhul) [35]. Teine potentsiaalne piirang on IRS-külade arv selles uuringus võrreldes ühe mitte-IRS-i ja ühe mitte-IRS-i/endise IRS-i külaga. Me ei saa eeldada, et ühe piirkonna üksikutes külades täheldatud sääsevektorite vastuvõtlikkuse tase on representatiivne Bihari teiste külade ja piirkondade vastuvõtlikkuse tasemele. Kuna India siseneb leukeemiaviiruse elimineerimisjärgsesse faasi, on hädavajalik vältida resistentsuse olulist arengut. Erinevate piirkondade, kvartalite ja geograafiliste piirkondade liivakärbeste populatsioonide resistentsuse kiire jälgimine on vajalik. Käesolevas uuringus esitatud andmed on esialgsed ja neid tuleks enne vektorite tõrjeprogrammide muutmist liivakärbeste madala populatsiooni säilitamiseks ja leukeemiaviiruse elimineerimise toetamiseks kontrollida, võrreldes neid Maailma Terviseorganisatsiooni avaldatud identifitseerimiskontsentratsioonidega [35], et saada täpsem ülevaade P. argentipes'i vastuvõtlikkuse staatusest nendes piirkondades.
Leukoosiviiruse vektor sääsk P. argentipes võib hakata näitama varajasi resistentsuse märke väga efektiivse tsüpermetriini suhtes. P. argentipese looduslike populatsioonide insektitsiidiresistentsuse regulaarne jälgimine on vajalik vektori tõrje meetmete epidemioloogilise mõju säilitamiseks. Insektitsiidiresistentsuse ohjamiseks ja leukoosiviiruse likvideerimise toetamiseks Indias on vajalik ja soovitatav erinevate toimemehhanismidega insektitsiidide rotatsioon ja/või uute insektitsiidide hindamine ja registreerimine.
Postituse aeg: 17. veebruar 2025